NAC/RvD1抑制H2O2诱导的COPD患者气道上皮细胞炎症性黏液高分泌的作用及机制研究

Protective effect and mechanism of NAC/RvD1 on H2 O2-induced diseased human bronchial epithelial cell of COPD of inflammatory response and mucus hypersecretion

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摘要目的研究N-乙酰半胱氨酸(NAC)或消退素D1(RvD1)抑制过氧化氢(H2O2)诱导的慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者原代气道上皮细胞(DHBE)炎症反应和黏液高分泌的分子机制.方法 DHBE细胞的分离、鉴定和培养,以最佳H2 O2浓度刺激DHBE细胞制备体外氧化应激模型,利用NAC和RvD1进行干预.采用免疫荧光技术、流式细胞术检测活性氧(ROS)水平;Western blot检测IKKβ 和NF-κB蛋白表达及磷酸化水平;qRT-PCR和ELISA法检测肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-8的表达水平;qRT-PCR和免疫荧光技术检测黏蛋白5AC(MUC5AC)表达水平.结果与对照组比较,H2 O2刺激DHBE细胞后,ROS表达水平升高(P<0.05),p-IKKβ和p-NF-κB表达呈浓度依赖性升高(P<0.05),细胞内TNF-α、IL-8 mRNA水平及细胞培养上清液中TNF-α、IL-8蛋白水平增多(P<0.05),MUC5AC的表达量增多(P<0.05).NAC或RvD1抑制H2 O2诱导的TNF-α、IL-8和MUC5AC的表达(P<0.05).结论 NAC、RvD1可能通过NF-κB信号通路在氧化应激对DHBE细胞炎症和黏液高分泌反应中发挥保护效应.