换一批
换一批microRNA-200a抑制肝细胞癌的进展及调控索拉非尼治疗效果的研究
Study on the effect of microRNA-200 a on the progression of hepatocellular carcinoma and the therapeutic effect of sorafenib
摘要目的 研究microRNA-200a(miR200a)影响肝细胞癌的进展及调控索拉非尼治疗效果.方法 构建人肝癌细胞miR200a稳转细胞株:miR200a过表达、对照组(Control)、miR200a敲低.采用qRT-PCR法检测各转染细胞株miRNA表达量,MTT的方法检测细胞活力,Western blot分析各目标蛋白表达量;Transwell法检测肝癌细胞迁移、侵袭能力.转染细胞株添加索拉非尼,复测MTT及Western blot,验证miR200a调控索拉非尼对细胞的作用和相应蛋白表达量变化,SPF级BALB/c-nu雄鼠18只,随机分为3组,每组6只.每组皮下种植miR200a过表达、Control、miR200a敲低细胞,待成瘤后每组裸鼠每天注射索拉非尼,连续14 d,处死裸鼠,取出瘤体,计算肿瘤体积,免疫组化验证瘤体目标蛋白表达及定位.结果 上调miR200a不仅可以抑制人肝癌细胞的细胞活力及迁移侵袭能力,还可以降低SIRT1的表达.并且上调miR200a明显减小裸鼠的肿瘤体积.结论 上调miR200a可以负性调控人肝癌细胞的增殖和迁移能力,并增加索拉非尼的药物疗效,这种作用可能是通过调控SIRT1表达来完成.
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