m6A去甲基酶FTO促进HER2阳性乳腺癌细胞对曲妥珠单抗耐药

m6 A demethylase FTO promotes the resistance of HER2-positive breast cancer cell to trastuzumab

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摘要目的探讨N6-甲基腺嘌呤(m6 A)去甲基酶肥胖相关蛋白(FTO)在乳腺癌细胞对曲妥珠单抗耐药中的作用及新型抗人表皮生长因子受体2(HER2)人源化A21抗体(HuA21)对耐药性乳腺癌细胞增殖的影响.方法制备曲妥珠单抗耐药细胞株(BT474/TR),光学显微镜观察BT474/TR与BT474细胞形态,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞增殖,免疫荧光法检测增殖相关抗原(Ki67)表达,流式细胞术检测细胞周期,qPCR和Western blot法检测FTO与甲基转移酶样蛋白3抗体(METTL3)表达.结果 BT474/TR出现细胞核固缩、伪足消失,细胞增殖速度下降.曲妥珠单抗处理BT474不同时间至形成耐药细胞,Ki67表达逐渐降低(P<0.05),S期细胞比例逐渐减小(P<0.05),FTO表达逐渐增加(P<0.05),但是METTL3表达没有变化.FTO抑制剂甲氯芬那酸乙酯(MA2)促进BT474/TR细胞增殖,且提高其对曲妥珠单抗的敏感性(P<0.05).HuA21抗体对BT474/TR细胞增殖具有抑制作用(P<0.05),且联合MA2和曲妥珠单抗对BT474/TR细胞抑制效果更好(P<0.05).结论 HER2阳性乳腺癌细胞FTO基因表达与其对曲妥珠单抗耐药之间存在相关性,抑制FTO活性可以增强乳腺癌耐药细胞对曲妥珠单抗治疗的敏感性;HuA21抗体对曲妥珠单抗耐药性乳腺癌细胞有抑制作用.