换一批摘要目的 探究蟾毒灵对肿瘤相关成纤维细胞(CAF)介导的肿瘤转移的作用机制.方法 从结肠癌患者组织中提取原代CAF,命名为CAF-1和CAF-2,并在共聚焦荧光显微镜下观察其形态和表面标志物表达.同时通过Western blot检测CAF表面标志物成纤维细胞激活蛋白(FAP)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、波形蛋白(VIM)的表达来确认CAF身份.收集CAF条件培养基,通过ELISA实验检测条件培养液中的白细胞介素6(IL-6)分泌水平.选取人结肠癌细胞HCT116,分为HCT116组、HCT116加CAF条件培养基组,用Western blot检测HCT116上STAT3信号通路相关蛋白P-STAT3、STAT3表达情况,通过Western blot检测HCT116上皮间充质转化(EMT)的情况,再通过划痕实验和Transwell实验明确HCT116迁移和侵袭能力的改变.将HCT116分为对照组和蟾毒灵组,两组均用CAF条件培养基刺激,观察STAT3信号通路激活情况、EMT和侵袭能力的改变.结果 原代细胞呈长梭形,并表达CAF表面标志物FAP、α-SMA和VIM.ELISA实验显示CAF分泌IL-6,Western blot结果显示,CAF的条件培养基激活了HCT116的STAT3信号通路,Western blot、划痕实验和Transwell实验显示HCT116迁移和侵袭能力增加.当加入蟾毒灵后,CAF的促进转移效应得到了抑制.结论 CAF通过释放IL-6激活了肿瘤细胞STAT3信号通路,促进了结直肠癌的转移.蟾毒灵通过抑制肿瘤细胞上STAT3信号通路的激活阻断该过程.
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