特立帕肽通过Wnt3a/β-catenin通路对高糖环境下成骨细胞分化的影响

Effect of teriparatide on osteoblast differentiation in high glucose environment through Wnt3 a/β-catenin pathway

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摘要目的研究特立帕肽(TPTD)通过Wnt3a/β-catenin通路对高糖环境下MC3T3-E1细胞向成骨分化的影响.方法实验分为5组:低糖组、低糖+TPTD组、高糖组、高糖+TPTD组、高糖+TPTD+G244-LM组.Calcein-AM染色及CCK-8法检测细胞增殖活性,碱性磷酸酶(ALP)及茜素红s染色观察细胞矿化结节形成情况,免疫荧光检测分析肌动蛋白形成情况,Real-time PCR检测Wnt3a、β-catenin、Tcf1、OPG、COLⅠmRNA表达情况.结果 TPTD对高糖条件下MC3T3-E1细胞的增殖活性无显著影响.低糖+TPTD组细胞ALP染色区域、蛋白活性及茜素红s染色面积均高于其他四组(P<0.05),且高糖组低于低糖组(P<0.05),高糖+TPTD组高于高糖组和高糖+TPTD+G244-LM组(P<0.05).低糖+TPTD组细胞骨架最清晰;高糖组和高糖+TPTD+G244-LM组细胞骨架清晰程度均低于高糖+TPTD组.低糖+TPTD组细胞Wnt3a、β-catenin、Tcf1、OPG、COLⅠmRNA水平最高(P<0.05);低糖组各基因mRNA水平均高于高糖组(P<0.05);高糖+TPTD组细胞各基因mRNA水平均高于高糖组和高糖+TPTD+G244-LM组(P<0.05).结论高糖抑制成骨细胞分化,TPTD通过调控Wnt3a/β-catenin通路促进高糖环境下成骨细胞分化.