摘要目的 应用生物信息学和分子生物学实验探讨Dick-kopf相关蛋白1(DKK1)在舌鳞状细胞癌(TSCC)中的表达及分子机制.方法 从TCGA-TSCC数据库下载患者信息,利用NetworkAnalysed网站筛选正常组织和癌组织间的差异表达基因,通过Kaplan-Meier分析和Lasson回归法寻找关键基因及临床预后,应用GO和KEGG分析差异表达基因的功能和通路,应用UALCAN数据库和免疫组化实验分析DKK1蛋白在TSCC中的表达,并分析其与临床病理特征的关系,应用Western blot实验检测DKK1 在TSCC细胞中的表达,利用siRNA敲低Cal27 细胞中DKK1 蛋白的表达.结果 Net-workAnalysed、Kaplan-Meier分析和Lasson回归法筛选出的 3个关键基因DKK1、CYP19A1 和IRX4 在TSCC中高表达,且高表达组的患者生存率差.UALCAN 数据库分析显示DKK1 的mRNA水平在TSCC组织中高于正常组织,其高表达与TSCC患者的临床分期、组织学分级和淋巴结转移相关.免疫组化实验显示,DKK1 蛋白在临床分期Ⅲ+Ⅳ期TSCC组织中的阳性率高于Ⅰ+Ⅱ期TSCC组织.与癌旁组织相比,DKK1 蛋白在TSCC组织中的表达水平升高.West-ern blot实验显示DKK1 蛋白在TSCC细胞Cal27 中的表达高于正常口腔上皮细胞 HOEC.在 TSCC 细胞 Cal27 中敲低DKK1 的表达后,β-catenin、p-p65 和 p65 蛋白表达量减少.结论 DKK1 在 TSCC组织和细胞中高表达且发挥重要作用,其可能作为TSCC早期诊断和药物治疗的新靶点.
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