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4种品系小鼠角质形成细胞原代培养比较研究

Comparative study on primary culture of four strains of mouse keratinocytes

摘要目的 体外分离、培养并鉴定成年小鼠背部皮肤角质形成细胞(KC);对比4 种品系小鼠KC的增殖与分化能力.方法 剪取4 种品系成年小鼠背部皮肤,剥离皮下脂肪组织,0.25%胰蛋白酶消化获得KC;免疫荧光法鉴定KC;显微镜下观察细胞生长状况;设计不同的种板时间和密度,使用CCK-8 法、EdU和高内涵法检测细胞增殖活力;通过Western blot检测4 种成年小鼠KC分化情况.结果 对4 种品系成年小鼠背部相同面积的皮肤组织进行胰蛋白酶消化,昆明(Kunming,KM)小鼠提取的KC数量最低,C57BL/6 提取的细胞数量最多;BALB/c、KM、裸小鼠分别以 8×103 个/孔的密度铺板增殖效率较高,C57BL/6 以 1.6×104 个/孔的密度铺板增殖效率较高;4 种品系小鼠,BALB/c小鼠原代KC较C57BL/6 小鼠原代KC增殖能力弱,分化程度差异无统计学意义.结论 采用简便易行的方法成功分离并比较 4 种成年小鼠背部皮肤原代KC的增殖和分化能力,为皮肤相关疾病模型小鼠的品系选择提供一定实验依据.

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