换一批
换一批miR-148b-3p调控疤痕疙瘩来源的成纤维细胞增殖的机制研究
Mechanism of miR-148b-3p regulating proliferation of keloid derived fibroblasts
摘要目的 分析miR-148b-3p对疤痕疙瘩来源的成纤维细胞增殖的影响.方法 通过Real-time PCR分析人瘢痕疙瘩来源成纤维细胞(HKF)和正常人成纤维细胞(NFs)中miR-148b-3p和SPARC的表达水平.通过Western blot检测细胞中富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白(SPARC)蛋白表达水平.利用细胞计数试剂盒8(CCK-8)法和平板克隆形成分析miR-148b-3p和SPARC对HKF增殖的影响.使用在线分析软件预测miR-148b-3p的靶基因,随后构建荧光素酶报告基因质粒,通过荧光素酶报告基因法分析miR-148b-3p与靶基因的靶向结合位点.结果 miR-148b-3p在HKF中低表达,SPARC在HKF中高表达.在HKF细胞中转染miR-148b-3p能够下调SPARC的表达,并抑制细胞增殖.在线分析软件预测miR-148b-3p能够靶向结合SPARC的3'-UTR;双荧光素酶报告基因的结果进一步证实miR-148b-3p能够靶向作用于SPARC的3'-UTR.在转染miR-148b-3p的HKF中再转染SPARC真核表达质粒,能够抵消miR-148b-3p的作用,恢复细胞增殖能力.结论 miR-148b-3p通过靶向作用于SPARC的3'-UTR,抑制其表达,抑制HKF增殖.
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关键词
病理性瘢痕miR-148b-3p富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白增殖pathological scarmiR-148b-3psecreted protein acidic and cysteine richproliferation
分类号
R619.6
栏目名称
基础医学研究
DOI
10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2023.09.016
发布时间
2023-10-16
基金项目
安徽省自然科学基金
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