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巨噬细胞特异性敲除MST1小鼠模型的构建

Construction of macrophage-specific MST1 knockout mouse model

摘要目的 制备髓系(包括巨噬细胞和粒细胞)特异敲除哺乳动物不育系20 样激酶 1(MST1)基因小鼠,为研究巨噬细胞MST1 在临床相关疾病发生中的作用及机制提供动物模型.方法 利用 MST1 基因携带 loxP 位点的小鼠(Mst1flox/flox)和髓系细胞特异表达LysM-Cre小鼠杂交构建巨噬细胞特异性敲除 MST1 小鼠(Mst1flox/floxLysM-Cre+,即Mst1ΔM/ΔM);通过聚合酶链式反应(PCR)分别扩增loxP位点和Cre基因进行基因型鉴定;通过定量PCR以及免疫荧光验证MST1 在巨噬细胞中的敲除效率;通过流式细胞术检测肝脏主要免疫细胞群.结果 Mst1flox/floxLysM-Cre+,即Mst1ΔM/ΔM为巨噬细胞特异性敲除 MST1 小鼠基因型;qPCR和免疫荧光检测表明骨髓来源的巨噬细胞和腹腔巨噬细胞的MST1 敲除效率达70%以上;流式检测表明敲除巨噬细胞MST1 基因对小鼠肝脏的主要免疫细胞群无明显影响.结论 成功构建巨噬细胞特异敲除MST1 小鼠模型,为进一步研究巨噬细胞 MST1 在临床相关疾病中的作用及机制奠定了基础.

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分类号 R392.2
栏目名称 基础医学研究
DOI 10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2023.10.011
发布时间 2023-12-06
基金项目
炎症免疫性疾病安徽省实验室开放基金项目 安徽医科大学第一临床医学院临床医学一体化)早期接触科研项目
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