干涉NFATc1表达影响细胞周期运转抑制结肠癌细胞增殖的机制

Mechanism study of interfered NFATc1 expression suppressing cell cycle progression in colorectal cancer cell

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摘要目的根据活化T-细胞核因子1(NFATc1)在结肠癌中的表达及预后情况,利用shRNA转染细胞干涉NFATc1 表达,检测NFATc1 对结肠癌细胞增殖各表型的影响,并初步分析可能的机制.方法利用 TCGA 数据库分析 NFATc1高表达对结肠癌预后的影响,取临床结肠癌患者术后样本进行免疫组化染色,比较NFATc1 在结肠癌组织和癌旁组织中的表达差异.通过将shRNA转染结肠癌细胞干涉NFATc1后,利用CCK-8 测定NFATc1 干涉后的细胞增殖变化;利用克隆形成实验预测NFATc1 干涉后结肠癌细胞成瘤潜力;利用碘化丙锭染色细胞,通过流式细胞仪分析细胞周期分布变化;利用qPCR检测NFATc1 对结肠癌细胞周期相关因子转录活性的影响.结果生存曲线显示NFATc1 高表达的结肠癌患者预后更差.临床结肠癌组织NFATc1 的表达高于癌旁正常组织.干涉NFATc1 导致结肠癌细胞的增殖速率明显降低,克隆形成能力显著减弱,细胞周期出现G0/G1 期停滞.qPCR结果表明干涉NFATc1 后,多个关键的细胞周期抑制因子转录活性明显上升.结论 NFATc1 通过抑制细胞周期调控因子转录活性促进细胞周期运转,从而促进结肠癌细胞增殖和成瘤能力.