摘要目的 运用Cre-loxP技术构建肝细胞特异性沉默信息调节因子3(silence information regulator 3,Sirt3)基因敲除(Sirt3 Δhep)小鼠,为研究肝细胞Sirt3 基因在疾病中的生物学功能提供重要动物模型.方法 将loxP标记的Sirt3flox/flox小鼠与 Alb-Cre 纯合子(Alb-Cre+/+)小鼠进行交配,F1 代Sirt3flox/-/Alb-Cre+/-小鼠再与Sirt3flox/flox小鼠进行交配并鉴定,F2 代基因型为Sirt3flox/flox/Alb-Cre+/-的小鼠即为本实验所构建的Sirt3 Δhep小鼠,Sirt3flox/flox/Alb-Cre-/-小鼠即为对照小鼠Sirt3flox/flox小鼠.提取鼠尾DNA,通过PCR鉴定子代小鼠的基因型;免疫荧光双染观察Sirt3 在小鼠肝细胞中的表达;提取Sirt3 Δhep小鼠原代肝细胞及心脏、脾脏、肾脏、肺组织蛋白,Western blot法验证Sirt3 在小鼠肝细胞及其他组织中的表达水平;HE染色观察小鼠肝脏及心脏、脾脏、肺等组织结构.结果 成功鉴定出Sirt3 Δhep小鼠;免疫荧光及Western blot结果显示,小鼠肝细胞中Sirt3 蛋白表达水平低于对照组小鼠(P<0.01),而Sirt3 Δhep小鼠的心脏、脾脏、肾脏和肺组织中Sirt3 表达与对照组相比无明显变化(P>0.05);HE染色结果显示Sirt3 Δhep小鼠肝脏、心脏、脾脏、肺、肾脏的组织学特征与对照组小鼠相比无明显变化.结论 成功构建肝细胞特异性Sirt3 基因敲除小鼠,为进一步研究肝细胞Sirt3 基因在相关疾病中的调控作用机制奠定了基础.