miR-27a靶向调控SFRP1对结直肠癌生物学行为的影响
Effect of miR-27a targeting regulation of SFRP1 on biological behavior of colorectal cancer
摘要目的 探讨miR-27a在结直肠癌中的表达,并分析其靶向调控分泌型卷曲相关蛋白 1(SFRP1)对人结直肠癌细胞HCT116 生物学行为的影响.方法 实时荧光定量 PCR(qRT-PCR)检测结直肠癌组织及癌旁正常组织中 miR-27a和SFRP1 mRNA的表达情况;Western blot检测结直肠癌组织及癌旁正常组织中SFRP1 蛋白表达水平;运用TargetScan预测软件及双荧光素酶报告基因实验检测 miR-27a 对SFRP1 的靶向调控作用;将 miR27a 模拟物(miR-27a mim-ic)、miR-27a抑制物(miR-27a inhibitor)及阴性对照(NC)转染至HCT116 细胞中;采用qRT-PCR测定各组细胞中miR-27a和SFRP1 mRNA的表达水平;运用四唑盐(MTT)比色法检测各组细胞增殖情况;Transwell实验评估各组细胞侵袭和迁移能力;Western blot检测各组细胞中SFRP1、Wnt/β-cate-nin信号通路中的关键因子Wnt4 和β-catenin的蛋白表达水平.结果 与癌旁正常组织相比,miR-27a在结直肠癌组织中高表达,而SFRP1 在结直肠癌组织中低表达(P<0.05);TargetScan预测软件和双荧光素酶报告基因实验表明miR-27a靶向调控SFRP1;与NC组相比,miR-27a mimic组miR-27a表达水平升高,细胞增殖、侵袭和迁移能力增强,SFRP1蛋白表达降低,Wnt4 和β-catenin蛋白表达增加(P<0.05);与miR-27a mimic 组相比,miR-27a inhibitor 组细胞内 miR-27a表达下降,细胞增殖、侵袭和迁移能力降低,SFRP1 蛋白表达增加,Wnt4 和β-catenin蛋白表达降低(P<0.05).结论 miR-27a能够靶向调控SFRP1,通过上调SFRP1,阻断下游的Wnt/β-catenin信号通路,抑制结直肠癌细胞的增殖、侵袭和迁移等生物学过程,从而发挥抑癌作用.为临床治疗提供了新方向.
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