双氢青蒿素对非小细胞肺癌细胞诱导的CD8+T细胞抗肿瘤免疫应答的影响
Effect of dihydroartemisinin on anti-tumor immune response of CD8+T cells induced by non-small cell lung cancer cells
摘要目的 探讨青蒿素衍生物双氢青蒿素(DHA)对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞诱导的CD8+T细胞抗肿瘤免疫功能的调控作用.方法 将NSCLC细胞系A549 细胞分为二甲基亚砜(DMSO)对照组和DHA处理组;分别用DMSO和不同浓度的DHA(25、50 和100 μmol/L)处理A549 细胞,根据半抑制浓度(IC50)选择最适浓度的DHA处理A549 细胞 0、24、48、72 h;CCK-8 法和集落形成实验检测DHA对A549 细胞增殖和集落形成能力的影响;密度梯度离心法分离健康个体外周血单个核细胞(PBMC),经黏附贴壁法去除单核细胞,随后与丝裂霉素C预处理的A549 细胞按照 10∶1 比例共培养,2 周后采用流式细胞术分别检测CD8+T细胞比例及其穿孔素和颗粒酶B的表达水平.结果 与对照组相比,25、50 和100 μmol/L DHA处理24h后的A549 细胞增殖的抑制率均升高(P<0.01);DHA对A549 细胞的IC50为46.26 μmol/L;依据IC50浓度检测50 μmol/L DHA处理A549 细胞0、24、48、72 h 的细胞抑制率分别为 1.53%、53.50%、63.84%和69.91%,分别与前一观察时间点即 0、24 和 48h相比,细胞抑制率均增高(P<0.01);集落形成实验结果显示,与对照组相比,DHA处理组的A549 细胞集落形成数减少(P<0.01);流式细胞术结果显示,与对照组相比,DHA预处理组的A549 细胞在共培养体系中诱导的CD8+T细胞的比例、表达穿孔素和颗粒酶B的CD8+T细胞比例均更高(P<0.01).结论 DHA 能够抑制 NSCLC 细胞生长,促进NSCLC细胞诱导的CD8+T细胞抗肿瘤免疫应答.
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