lncSIL通过EZH2/P21/CDK6信号通路负向调控TGF-β1诱导的肺泡上皮细胞间质转化

The lncSIL molecule exerts a negative regulatory effect on the alveolar epithelial-mesenchymal transition induced by TGF-β1 through modulation of the EZH2/P21/CDK6 signaling pathway

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摘要目的研究在转化生长因子β1(TGF-β1)诱导肺泡上皮细胞间质转化(EMT)进程中lncSIL的作用及其相关信号通路.方法采用 Western blot 法研究沉默 lncSIL 后对TGF-β1 诱导 EMT 进程中细胞标志蛋白 E-钙黏蛋白(E-cad)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和Ⅰ型胶原蛋白(Col Ⅰ)表达的影响;通过RNA pulldown分析lncSIL相互作用蛋白,并检测过表达或沉默lncSIL后对其靶基因组蛋白赖氨酸N-甲基转移酶(EZH2)以及下游因子P21 蛋白(P21)和细胞周期蛋白依赖性激酶 6(CDK6)表达的影响,并结合流式细胞术分析lncSIL对细胞周期进程的作用.结果沉默lncSIL后,间质细胞标志蛋白α-SMA和Col I表达升高,肺泡上皮细胞标志蛋白E-cad表达下降;RNA pulldown实验结果显示EZH2 是与lncSIL 相互作用的靶蛋白,并且沉默 lncSIL 后EZH2 表达升高,其下游基因 P21 表达下调,CDK6 表达上调,同时S期细胞的数量显著升高;过表达lncSIL时,EZH2与CDK6 表达下调,P21 表达上调,同时S期细胞的数量明显降低.结论 lncSIL通过负向调控EZH2/P21/CDK6 信号通路抑制细胞周期进程进而抑制TGF-β1 诱导的肺泡上皮细胞向间质转化.