棕榈油酸在缺氧/复氧心肌细胞焦亡中的作用及机制研究
The role and mechanism of palmitoleic acid in the pyroptosis of cardiomyocytes after hypoxia/reoxygenation-induced injury
摘要目的 探讨棕榈油酸(POA)对心肌缺氧/复氧损伤后心肌细胞焦亡的影响.方法 实验设置对照组(Control)、缺氧/复氧组(HR)、棕榈油酸处理组(HR+POA)、溶剂无水乙醇(ET)对照组(HR+ET);采用CCK-8法检测心肌细胞活力,Hoechst33342/PI双染和乳酸脱氢酶(LDH)试验检测心肌细胞焦亡水平.ELISA法检测细胞培养上清液中炎症因子白细胞介素(IL)-1β、IL-18释放量,qRT-PCR法和Western blot分别检测细胞焦亡相关分子NLRP3、ASC、Caspase-1、GS-DMD、1L-1β及IL-18的mRNA和蛋白相对表达水平.结果 CCK-8结果显示,与HR组相比,加入不同浓度POA干预,POA浓度在25~100 μmol/L时能增加缺氧/复氧心肌细胞活力;构建心肌细胞缺氧/复氧模型,与对照组相比,HR组中 NLRP3、ASC、Cleaved-caspase 1、GSDMD-N、IL-Iβ 及 IL-18基因的蛋白和mRNA表达增加(P<0.05),Hoechst33342/PI心肌细胞染色阳性百分比增加(P<0.05),且LDH、IL-Iβ及IL-18 释放增加(P<0.05);100 μmol/L POA 干预后,与 HR+ET 组相比,HR+POA 组中 NLRP3、ASC、Cleaved-caspase 1、GSDMD-N、IL-Iβ及IL-18的蛋白和mRNA表达降低(P<0.05),Hoechst33342/PI心肌细胞染色阳性百分比降低,且LDH、IL-Iβ及IL-18水平降低(P<0.05).结论 棕榈油酸可能通过抑制缺氧/复氧后心肌细胞焦亡和炎症反应,改善心肌细胞缺氧/复氧损伤.
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