蒲公英甾醇对Erastin诱导的软骨细胞铁死亡的保护作用及机制

The protective effect and mechanism of Taraxasterol on Erastin induced ferroptosis in chondrocytes

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摘要目的探究蒲公英甾醇(TAR)对Erastin诱导的C28/I2软骨细胞铁死亡的作用.方法用Erastin诱导C28/I2软骨细胞系构建体外软骨细胞铁死亡模型,实验分为Control组、Erastin 组、TAR 组、TAR+Erastin 组.CCK-8 法检测细胞活力;乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒和Calcein/PI细胞活性与细胞毒性检测试剂盒检测细胞毒性;流式细胞术检测脂质活性氧(ROS)含量;谷胱甘肽(GSH)试剂盒检测细胞内GSH含量;JC-1染色和RH123染色检测线粒体膜电位;Western blot法检测铁死亡关键指标酰基辅酶A合成酶长链家族成员4(ACSL4)和谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)蛋白表达变化.结果 TAR可以恢复Erastin处理导致的C28/I2软骨细胞细胞活力降低以及减少Erastin诱导的细胞毒性(P＜0.01);与Control组比较,Erastin处理后细胞内脂质ROS水平升高(P＜0.01),GSH含量降低(P＜0.01),而TAR可以减少脂质ROS产生(P＜0.01),增加GSH含量(P＜0.01);TAR可以恢复铁死亡的C28/I2软骨细胞线粒体膜电位,减少ACSL4蛋白的表达(P＜0.01),增加GPX4蛋白的表达(P＜0.01);此外,TAR可以恢复IL-1β刺激导致的软骨细胞活力降低.结论 TAR可以抑制Erastin诱导的C28/I2软骨细胞铁死亡,这一过程可能与调控ACSL4、GPX4蛋白表达有关.