PGE2抑制TDO2表达和活性调控巨噬细胞功能变化的机制

The specific mechanism of PGE2 inhibiting TDO2 expression and activity regulation of macrophage function changes

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摘要目的探究色氨酸-2,3-双加氧酶(TDO2)在胶原诱导型关节炎(CIA)小鼠中的表达以及前列腺素E2(PGE2)抑制TDO2表达和活性调控巨噬细胞功能的机制.方法 Ⅱ型胶原诱导DBA/1J小鼠制备CIA模型.X射线检测CIA小鼠踝关节损伤变化;免疫组化检测小鼠踝关节、脾脏中TDO2表达;qPCR和免疫荧光检测小鼠腹腔巨噬细胞中TDO2表达变化.通过在RAW264.7细胞中分别小干扰TDO2、给予TDO2抑制剂680C91、给予不同浓度PGE2(0.1、1、10 μmol/L)刺激和给予前列腺素受体4(EP4)激动剂 CAY10598 后,qPCR 和 Western blot 检测 TDO2 表达;流式细胞术检测巨噬细胞吞噬和极化功能;比色法检测TDO2活性.结果与正常组小鼠比较,CIA小鼠踝关节软组织肿胀变大,关节滑膜、脾脏及腹腔巨噬细胞中TDO2表达增加.在RAW264.7细胞中分别小干扰TDO2、给予TDO2抑制剂680C91、给予PGE2刺激、给予EP4受体激动剂CAY10598后TDO2表达明显被抑制,巨噬细胞吞噬功能下降,M1/M2比值下降(P＜0.05);比色法结果显示RAW264.7细胞中分别给予PGE2刺激以及EP4激动剂CAY10598后TDO2的活性被抑制(P＜0.05).结论巨噬细胞TDO2表达升高可能促进了 CIA小鼠关节滑膜损伤,PGE2通过激活EP4受体抑制TDO2表达和活性从而调节巨噬细胞功能.