2-APB通过PKCα/HIF-1α信号通路抑制H2O2诱导的软骨细胞凋亡

2-APB inhibits H2O2-induced chondrocyte apoptosis through PKCα/HIF-1α signaling pathway

二维码有效期 120s

摘要目的探讨2-氨基乙氧基苯硼酸(2-APB)对H2O2诱导的软骨细胞凋亡的作用及其机制.方法实验分为Con-trol 组、H2O2 组、2-APB 组和 H2O2+2-APB 组.CCK-8 法检测各组细胞活力;显微镜下观察2-APB对H2O2诱导的软骨细胞形态变化的影响;TUNEL法和流式细胞术检测软骨细胞凋亡情况;流式细胞术检测脂质活性氧(ROS)水平;West-ern blot法检测2-APB对H2O2诱导的各组细胞中Cleaved-PARP、p-PKCα和HIF-1α蛋白的表达情况;免疫荧光法检测PKCα抑制剂BIM-Ⅰ对H2O2诱导的各组细胞中HIF-1α的荧光表达情况.结果 2-APB对H2O2诱导的软骨细胞凋亡具有抑制作用,且当2-APB浓度为100 μmol/L时抑制效果最为显著(F=235.80,P＜0.01);2-APB能够抑制H2O2所致软骨细胞凋亡阳性率(F=114.80,P＜0.01)以及ROS的水平(F=52.99,P＜0.01),并且抑制 Cleaved-PARP(F=10.10,P＜0.05)、p-PKCα(F=24.56,P＜0.05)和 HIF-1α(F=6.85,P＜0.05)蛋白的表达;PKCα抑制剂BIM-Ⅰ能够抑制H2O2所致HIF-1α荧光强度的增加.结论 2-APB可以通过抑制PKCα/HIF-1α通路减少H2O2诱导的软骨细胞凋亡,进而保护软骨细胞.