摘要目的 探讨Toll受体4(TLR4)在对乙酰氨基酚(APAP)诱导的人正常肝细胞(L02)损伤后肝细胞再生中的作用以及其可能机制.方法 体外培养L02细胞,利用CCK-8法检测细胞活力,筛选出APAP最佳作用浓度和作用时间、TLR4抑制剂(TAK-242)作用浓度.Western blot法检测核因子-κB(NF-κB)、微管相关蛋白轻链3(LC3)、螯合体1(p62)、受体相互作用蛋白激酶1(RIP1)、受体相互作用蛋白激酶3(RIP3)、信号转导和转录激活因子3(STAT3)、磷酸化信号转导和转录激活因子3(p-STAT3)、增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)蛋白表达水平.qRT-PCR法检测TLR4、NF-κB、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6、IL-1β、PCNA、Cyclin D1、细胞增殖核抗原(Ki67)mRNA表达水平.结果 根据CCK-8结果,选择APAP 5 mmol/L作用L02细胞24、36、48 h模拟体外肝脏损伤及损伤后再生模型,TAK-242 100 nmol/L于APAP给药前2h 预处理抑制 TLR4.与对照组相比,APAP 24 h 组的 NF-κB、RIP1、p-STAT3、PCNA、Cyclin D1 蛋白水平和 TNF-α、IL-1β、PCNA mRNA 水平升高;APAP 36 h 组的 NF-κB、RIP1、RIP3、p-STAT3、PCNA、Cyclin D1 蛋白水平和 TLR4、NF-κB、TNF-α、IL-1 β、PCNA、Cyclin D1 mRNA 水平升高;APAP 48 h 组的 NF-κB、RIP1、p-STAT3、PCNA、Cyclin D1 蛋白水平和 TLR4、NF-κB、TNF-α、IL-1β、IL-6、PCNA、Cyclin D1、Ki67 mRNA 水平升高.相较于同时间点 APAP 组,APAP+TAK-242 24 h 组和 48 h 组的 NF-κB、RIP1、RIP3、p-STAT3、PCNA、Cyclin D1 蛋白水平和 TLR4、NF-κB、TNF-α、IL-1β、IL-6、PCNA、Cyclin D1、Ki67 mRNA 水平明显降低;APAP+TAK-242 36 h 组的 NF-κB、PCNA 蛋白水平和 TLR4、NF-κB、TNF-α、IL-1β、IL-6、PCNA、Ki67 mRNA 水平也明显低于APAP 36 h组.与对照组相比,APAP组自噬激活,而APAP+TAK-242组自噬被抑制.结论 TLR4可能影响TLR4/NF-κB通路,上调炎症因子和自噬水平,促进APAP诱导的L02细胞肝损伤后的肝细胞再生.