换一批老年大鼠脑组织小胶质细胞的分离及表型的流式鉴定
Isolation of microglia from aged rat brain tissue and phenotypic identification by flow cytometry
摘要目的 建立一种优化的方法,从老年大鼠脑组织中分离纯化小胶质细胞,并对小胶质细胞表面表型进行流式鉴定.方法 以年轻大鼠(3月龄)为对照,采用IV型胶原酶联合机械消化的方式制备老年大鼠脑组织单细胞悬液,用30％-37％-70％Percoll分离液分离纯化小胶质细胞,并对细胞进行荧光标记,通过流式细胞术检测老年大鼠脑组织的小胶质细胞表型.结果 采用IV型胶原酶联合机械消化,并结合密度梯度离心的方法,可以获得更多数量的单细胞,且细胞存活率均大于90％.流式检测结果显示:与年轻大鼠相比,老年大鼠脑组织M1型小胶质细胞表面标志物CD86和MHC Ⅱ表达均增多(P＜0.01),M2型小胶质细胞表面标志物CD200R表达也增多(P＜0.01).结论 采用IV型胶原酶联合机械消化,并结合密度梯度离心分离,是较好的分离纯化成年和老年大鼠脑组织小胶质细胞的方法.
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关键词
衰老神经炎症小胶质细胞分离纯化流式细胞术表面标志物agingneuroinflammationisolation and purificationmicrogliaflow cytometrysurface marker
分类号
R338.2（人体生理学）
栏目名称
DOI
10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2024.11.011
发布时间
2024-12-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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