换一批Neu RNAi对卵巢癌细胞生长、凋亡及药物敏感性的作用
Effects of Neu RNAi on growth, apoptosis, and chemoresistance of ovarian cancer cell SKOV3/DDP
摘要目的 探讨neu RNAi对卵巢癌耐药细胞株SKOV3/DDP细胞生长、凋亡及药物敏感性的作用,寻找下调基因表达并逆转化疗耐药的方法,为卵巢癌的基因治疗探索新途径.方法 应用含有U6启动子的pSilencer 1.0-U6表达载体构建neu基因的小干扰RNA(siRNA)表达载体(pSilencer-neu),用脂质体方法将pSilencer-neu转染卵巢癌顺铂耐药细胞株SKOV3/DDP,另设未转染组及转染pSilencer-control组为对照.显微镜下观察转染前后细胞的变化;用RT-PCR及Western Blot检测neu基因mRNA及蛋白的表达;MTT法检测细胞生长情况;流式细胞仪检测细胞凋亡及周期的变化;加入顺铂后检测BNAi对SKOV3/DDP顺铂药物敏感性的影响.结果 neu RNAi可明显下调卵巢癌耐药细胞株SKOV3/DDP中neu的基因表达;使其细胞生长受到抑制,生长速度减慢,生长曲线低平;细胞凋亡增加且细胞周期发生变化,G1/G0期细胞增多,S期细胞则减少;顺铂耐药实验显示,转染RNAi的SK-OV3/DDP细胞IC50明显下调,细胞凋亡率显著增加.结论 应用RNAi可以部分阻抑neu基因在卵巢癌顺铂耐药细胞株SKOV3/DDP中的表达,使SKOV3/DDP细胞生长减慢、凋亡增加,而且对顺铂的敏感性增强.
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DOI
10.3969/j.issn.1672-1535.2010.04.018
发布时间
2010-09-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家自然科学基金（30271470）
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