家蚕同源异型结构域蛋白基因Bmvis的克隆及组织表达和亚细胞定位
Cloning, Expression Profile and Subcellular Localization of Bombyx mori Homeodomain Protein Gene Bmvis
摘要同源异型结构域蛋白( homeobox,HOX)基因是对生物体的生长发育从时间和空间上进行调控的一类基因.Vis( vismay)属于同源异型结构域蛋白转化生长影响因子(transforming growth interacting factor,TGIF)家族成员,在脊椎动物的研究中表明TGIF是转化生长因子-β(transforming growth factor β,TGF-β)信号转导途径中的转录抑制子,但在果蝇(Drosophila melanogaster)的研究中发现其是一种转录激活子.基于为探究家蚕(Bombyx mori)中vis基因的功能提供基础信息的目的,在电子克隆的基础上通过RT-PCR从家蚕5龄幼虫精巢cDNA中克隆了长度为847 bp的vis基因(Bmvis)片段(GenBank登录号:JF412700).蛋白结构分析表明Bmvis在HOX结构域的螺旋区和TALE区段内高度保守,同时在HOX结构域外的C末端大约20个氨基酸也是高度保守的.进化分析显示昆虫的Vis与Achi (achintya)聚为一类,但Vis与Achi根据物种分类关系聚在一起.对Bmvis在家蚕5龄第3天幼虫组织中表达的RT-PCR检测显示其仅在精巢中表达.将Bmvis进行原核表达后获得抗Bmvis多克隆抗体,亚细胞定位显示Bmvis在细胞核和细胞质中均有表达,但主要分布在细胞核中.
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