乳腺癌相关抗原ROR1 H-2Kd限制性CTL表位预测及初步鉴定
Prediction and identification of H-2Kd restricted CTL epitope derived from breast cancer associated antigen ROR1
摘要目的:预测并鉴定乳腺癌相关抗原受体酪氨酸激酶样孤儿受体1 (receptor tyrosine kinase like orphan receptor 1,ROR1)H-2Kd限制性细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL)表位,为研究以ROR1为靶点的乳腺癌免疫治疗奠定基础.方法:采用生物信息学方法预测乳腺癌相关抗原ROR1H-2Kd限制性CTL表位,选取预测软件中评分较高的抗原表位肽进行人工合成及纯化.肽结合试验检测抗原表位肽与H-2Kd分子的亲和力.选用亲和力较高的抗原表位肽体外刺激脾淋巴细胞,ELISA法检测细胞因子γ-干扰素(interferon-γ,IFN-γ)和白介素-12(interleukin-12,IL-12)的分泌.结果:预测的4条候选ROR1 CTL表位肽均具有较高的亲和力,其荧光指数(fluorescence index,n)在30μg/ml时均大于1.5.ELISA结果显示表位肽ROR1 (NYMFPSQGI)可在体外有效诱导IFN-γ和IL-12细胞因子的产生.结论:ROR1(NYMFPSQGI)为乳腺癌相关抗原ROR1H-2Kd限制性CTL表位,为研究以ROR1为靶点的乳腺癌免疫治疗奠定了基础.
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