换一批基因熔解曲线谱型图技术分析肺结核患者CD4+T细胞受体β链可变区基因多态性
Gene melting curve spectratyping technique in analyzing polymorphism of T-cell receptor beta chain variable region in CD4+T cells of tuberculosis patients
摘要目的 利用荧光定量PCR结合基因熔解曲线谱型图(gene melting curve spectratyping,GMCS)技术分析肺结核病患者外周血CD4+T细胞中T细胞受体(TCR)β链可变区(BV)基因多态性.方法 提取15例健康人和30例肺结核患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)中的总RNA,反转录成cDNA,以26个人TCR BV基因家族设计上游引物,共同的TCRβ链恒定区(BC)基因设计下游引物,荧光定量PCR扩增26个TCR BV基因家族谱系,样品谱系用荧光定量PCR中的DNA熔解曲线进行分析.结果 在15例健康人外周血T细胞TCR β链中,同一BV位点PCR产物的熔解曲线谱型相同.但是与健康人相比,30例肺结核患者的外周血TCR β链26个BV位点熔解曲线谱型存在差异,差异比率为6.7％～33.3％,差异具有显著性(P＜0.05,P＜0.01).此外,26个位点中有13个位点熔解曲线谱型差异比率≥20％.结论 荧光定量PCR结合GMCS技术分析TCR BV基因家族谱系情况,方法稳定、简便,能较好地监测肺结核患者外周血T细胞TCR的β链谱型.
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关键词
CD4阳性T淋巴细胞T细胞受体β基因遗传多态现象肺结核CD4-positive T-lymphocytesT cell receptor beta genesgenetic polymorphismpulmonary tuberculosis
分类号
R392.22（医学免疫学）
栏目名称
DOI
10.3724/SP.J.1008.2013.01317
发布时间
2014-01-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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