换一批逆转录病毒载体介导胰岛素原基因突变体与葡萄糖激酶基因共转染的应用价值
Glucokinase gene and mutant proinsulin gene transfected by retroviral vector
摘要目的研究逆转录病毒载体介导基因共转染的效率,探讨其在基因共转染领域的应用价值.方法以携葡萄糖激酶(glucokinase, gk)基因的逆转录病毒及携人胰岛素原基因突变体(mutant proinsulin gene,mpin)的逆转录病毒共同感染HepG2细胞,经G418筛选,放免法、SDS-PAGE、Western-blot挑选联合表达GK及成熟胰岛素的HepG2细胞,RT-PCR鉴定.结果 G418筛选3周获阳性细胞克隆,采用放射免疫法、SDS-PAGE、Western-blot从20个细胞克隆中挑选出联合表达GK及成熟胰岛素的HepG2细胞4株,选取1株命名为细胞克隆"β";RT-PCR证实细胞"β" 中已有两个目的基因的转录.结论在需要目的基因长期表达的基因共转染领域,逆转录病毒载体仍有一定的应用价值,但如何提高其介导的基因共转染效率有待进一步探究.
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DOI
10.3321/j.issn:1000-5404.2004.22.015
发布时间
2004-12-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家自然科学基金（30070356）
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