换一批epoxomicin可诱发前列腺癌细胞内质网应激蛋白GADD153促进细胞凋亡
Epoxomicin induces endoplasmic reticulum stress protein GADD153/CHOP to promote cell apoptosis in prostate cancer DU145 cells
摘要目的 探讨蛋白酶体抑制剂(epoxomicin,EPO)诱导前列腺癌DU145细胞凋亡及其与GADD153/CHOP的关系.方法 不同浓度的EPO处理DU145不同时间,MTS检测细胞生长情况;流式细胞仪检测细胞凋亡率情况;Real-timePCR检测内质网应激的相关分子GADD153、GRP78 mRNA以及Western blot方法检测GADD153、GRP78蛋白表达情况;转染GADD153siRNA从而沉默基因GADD153,通过基因转录水平及蛋白水平检测GADD153证实转染是否成功;转染GADD153后,通过MTS法及流式细胞仪技术检测细胞增殖情况及凋亡情况.结果 EPO抑制DU145细胞生长,并呈现剂量、时间依赖.处理组细胞凋亡率高于未处理组,高剂量组凋亡率高于低剂量组.EPO处理后GADD153,GRP78基因转录水平随时间逐渐升高,72 h最为明显.GADD153、GRP78蛋白在EPO处理后不断增加,均在72 h增加到最高,且低剂量与高剂量组在72 h差异有统计学意义(P＜0.05).转染GADD153siRNA后,GADD153基因转录水平及蛋白表达水平明显降低,其中GADD153siRNA 50 nmol/L最为明显.沉默基因GADD153后,EPO处理DU145细胞,其细胞数目的减少部分被阻断,细胞凋亡部分被阻断.结论 蛋白酶体抑制剂epoxomicin能抑制DU145细胞生长,诱导凋亡,其机制可能与激活内质网应激,诱发内质网的相关分子GADD153表达有关.
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医学主题词
内质网应激(Endoplasmic Reticulum Stress)细胞(Cells)蛋白(Egg White)细胞凋亡(Apoptosis)蛋白酶体抑制剂(Proteasome Inhibitors)
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2015-01-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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