人MUC-1全长cDNA基因真核表达载体构建及在COS-7细胞中的表达
Construction of eukaryotic expression vectors containing coding of human full length MUC-1 gene and its expression in COS-7
目的构建含人MUC-1全长cDNA序列的真核表达载体,并观察其在COS-7细胞中的表达. 方法将目的基因MUC-1克隆入pGEM-3zf(-)载体中并进行酶切鉴定和DNA序列测定. 亚克隆入真核质粒pcDNA3.1(+),构建真核表达载体pcDNA3.1(+)-MUC-1. 用电穿孔法将重组质粒转入COS-7细胞,以免疫荧光和流式细胞仪检测MUC-1的表达. 结果酶切鉴定和序列分析证实,重组质粒含有人MUC-1全长cDNA编码序列,转染实验表明MUC-1基因能在COS-7细胞中表达. 结论人MUC-1全长cDNA基因真核表达载体构建及其在COS-7中的表达均获成功,为基因疫苗的进一步研究奠定了基础.
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