换一批大肠埃希菌ETT2毒力岛ECs3703基因和HPI毒力岛irp2基因双重LAMP检测方法的建立
Establishment of Duplex Loop-mediated Isothermal Amplification for Detecting Genes of Escherichia coli ETT2 and HPI Pathogenicity Islands
摘要根据GenBank中大肠埃希菌ETT2毒力岛保守基因ECs3703和HPI毒力岛的保守基因irp2分别设计一套LAMP引物,在同一体系中进行LAMP扩增,通过对体系Mg2+、dNTP、内引物及反应温度和反应时间等进行优化,建立了在60℃恒温下对大肠埃希菌ETT2和HPI毒力岛进行同步检测的LAMP方法,并进行了特异性和灵敏性试验.结果显示,所建立的双重LAMP检测方法同时检测ETT2和HPI毒力岛大肠埃希菌检测限均可达到100 fg,比常规PCR灵敏度高100倍.利用该方法对8株非大肠埃希菌进行LAMP扩增,结果均为阴性.用该方法对采集的20份临床样品进行检测,与双重PCR检测结果一致.结果显示,该双重LAMP方法可用于大肠埃希菌ETT2和HPI毒力岛的同步快速检测,可作为临床疫病诊断的有效手段.
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关键词
大肠埃希菌ETT2毒力岛HPI毒力岛双重LAMPEscherichia coliETT2 pathogenicity islandHPI pathogenicity islandduplex LAMP
分类号
S852.612
栏目名称
发布时间
2017-04-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家自然科学基金（31440083）
江苏省高等学校大学生创新创业训练计划（201512806029H）
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