换一批鸡传染性支气管炎病毒S1蛋白的真核表达及免疫原性分析
Eukaryotic Expression and Immunogenicity Analysis of Avian Infectious Bronchitis Virus S1 Protein
摘要为真核表达鸡传染性支气管炎病毒(IBV)的S1蛋白并鉴定其免疫原性,构建了IBV广西优势血清型代表株GX-YL5 S1蛋白基因的重组表达载体pFastBacTM/HBM-TOPO-S1,转化DH10Bac细胞进而拯救出重组杆状病毒;经间接免疫荧光(IFA)和Western blot鉴定并大量表达;纯化后免疫新西兰大白兔制备兔抗血清,应用IFA和Western blot对该重组蛋白的反应原性进行鉴定,并应用气管环(TOC)中和试验分析其免疫原性.IFA显示重组杆状病毒感染后72 h细胞出现特异性荧光;Western blot显示重组蛋白与抗His标签单克隆抗体以及IBV特异性抗体均能结合,且反应性良好,特异性强;中和试验显示制备的血清对IBV的中和滴度为1:512.表明该重组S1蛋白具有较好的免疫原性,为IBV S1蛋白的生物学功能、基因工程亚单位疫苗等研究奠定了基础.
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DOI
10.3969/j.issn.1007-5038.2020.12.007
发布时间
2020-12-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家自然科学基金项目（31860715）；
广西自然科学基金项目（2018GXNSFAA281009）；
南宁市科技开发项目（20182024-1）；
南宁市兴宁区科技开发项目（2018A11）；
"大学生创新创业训练计划"国家级创新训练项目（201810593084）
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