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人肺腺癌吉西他滨耐药细胞系的建立及其特性

Development and Characterization of a Gemcitabine-resistant Variant of Human Lung Adenocarcinoma Cell Line A549

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摘要背景与目的:临床前和临床研究显示吉西他滨对实体瘤有较好的疗效,尽管已有卵巢癌和红白血病吉西他滨耐药细胞系的报道,但肺癌吉西他滨耐药细胞系尚未见报道.我们建立了人肺腺癌吉西他滨耐药细胞系,并对其细胞生物学特性进行研究.方法:逐步增加培养基中吉西他滨的浓度,建立了对吉西他滨耐药的人肺腺癌细胞系A549-Gem.采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法和集落形成实验,计算出A549和A549-Gem的半数抑制浓度(IC50)和耐药系数(RI).比较A549和A549-Gem的生长曲线,并计算出两细胞系的倍增时间.采用MTT法检测A549-Gem对几种常用抗肿瘤药物的交叉耐药谱.结果:吉西他滨对A549和A549-Gem的IC50分别为(6.56±1.19)μmol/L和(921.09±225.27)μmol/L,RI为140.52(P=0.019 5).集落形成实验的RI为132.95.根据生长曲线计算出A549和A549-Gem的倍增时间为29.7h和36.4h.交叉耐药实验表明,A549-Gem对长春新碱(VCR)和足叶乙甙(VP-16)的RI分别为54.38和6.18(P＜0.01),对阿霉素(ADM)、顺铂(DDP)、阿糖胞苷(Ara-C)和紫杉醇(Taxo1)无交叉耐药.结论:成功建立了人肺腺癌吉西他滨耐药细胞系A549-Gem,耐药性能明显、稳定,非常适合用于肺癌中吉西他滨耐药的研究.A549-Gem对VCR、VP-16产生交叉耐药,对ADM、DDP、Ara-C和Taxol无交叉耐药.