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血液实验教学中血浆制备的条件优化及储存时间对实验效果的影响

Optimization of Plasma′s Preparation and Effect of Its Storage Time on Clotting Time in Blood Experiment

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摘要目的：对生理学血液实验教学中富血小板血浆（ platelet-rich plasma，PRP）及少血小板血浆（platelet-poor plasma，PPP）制备条件进行优化，并明确血浆储存时间对实验效果的影响。方法：比较家兔麻醉状态下不同采血方法、家兔有无麻醉、采血后血液置于不同材质的试管以及不同离心参数等因素对 PRP 及 PPP 凝血时间以及得率的影响；并且测定储存时间对制备的血浆凝固时间的影响。结果：（1）家兔麻醉状态下，三种采血法（头皮针颈动脉采血、颈动脉放血、心脏采血）无明显差异；（2）采用心脏采血方法，在家兔清醒状态下采血所得 PRP 凝固时间比麻醉状态下的时间更短（P ﹤0.001）；（3）玻璃离心管作为容器所得 PRP 和 PPP 的凝固时间分别较塑料离心管的短（P ﹤0.001），且塑料离心管所得 PPP 得率高于玻璃采血管（P ﹤0.01）；（4）三种离心参数制备 PRP，以Aghaloo 法 PRP 的凝固时间最长（P ﹤0.001），本科室传统离心法与 Landesberg 法的凝固时间无统计学差异；Land-esberg 法和 Aghaloo 法的 PRP 得率无差异，但较本科室传统离心法高（P ﹤0.001）；（5）PRP 和 PPP 于-20℃储存1~360 d 后，对血浆凝固时间无明显影响。结论：PRP 的制备以家兔在清醒状态下、心脏采血、采用玻璃离心管、以 Landesberg 法离心，血浆得率高、凝固时间短；PPP 的制备采用塑料离心管，以1500× g 离心30 min，血浆得率高、凝固时间长。将所得血浆分装，-20℃保存，血小板活性可保持一年。