摘要目的 糖酵解抑制剂2-脱氧葡萄糖(2-deoxyglucose,2DG)可以特异性阻断癌细胞Warburg效应发挥抗肿瘤作用,其靶点是葡萄糖转运蛋白(glucose transporter type 1,GLUT-1).但GLUT-1的表达是否影响2DG的作用效率尚不得知,因此,笔者拟在食管癌细胞中证明GLUT-1的表达是否影响食管癌对2DG的敏感性及其可能的作用机制.方法 本研究通过体外试验,使用细胞转染技术过表达及敲除食管癌细胞GLUT-1蛋白,将细胞行2DG干预后,使用噻唑蓝比色[3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide,MTT]法测定细胞活性,酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)法测定上清葡萄糖含量.并进一步使用免疫蛋白印迹(western blot,WB)法测定细胞内磷酸化蛋白激酶B (phosphor-protein kinase B,p-Akt)及LC3蛋白家族B(LC3-B)表达水平.结果 Eca-109和TE-1细胞中,GLUT-1高表达组72 h细胞数是空白对照组的1.44倍和1.46倍,葡萄糖消耗是空白对照组的1.62倍和1.39倍,GLUT-1低表达组的细胞数分别是相应空白对照组的59.4％和58.2％,葡萄糖消耗分别是空白对照组的33.1％和27.6％,组间差异均有统计学意义(P＜0.05);加入2DG干预后,GLUT-1高表达组72 h细胞抑制率分别为56％及71％,葡萄糖消耗减少50％及49％,空白对照组的抑制率分别为43％及34％,葡萄糖消耗减少15％及27％,GLUT-1低表达组分别为28％及17％,葡萄糖消耗减少7％及9％,组间差异均有统计学意义(P＜0.05).使用LY294002阻断蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)通路后,两株细胞的组间差异均无统计学意义(P＞0.05).WB法检测显示GLUT-1表达与p-Akt呈正相关,高表达GLUT-1的细胞LC3-B水平较低,使用2DG干预后,所有细胞LC3-B水平均明显增高,p-Akt表达显著降低.结论 食管癌细胞中,GLUT-1是2DG的作用靶点,其表达上调增强细胞对2DG的敏感性,Akt信号通路可能参与其相关机制.同时,2DG还可能通过Akt通路影响食管癌细胞的自噬水平,值得临床进一步研究和探索.