换一批梅花类黄酮3'-羟化酶基因片段基于基因组DNA的简并PCR法克隆
Cloning of the segment of flavonoid 3′-hydroxylasegene from the gDNA of Prunus mume by degenerate PCR
摘要用本研究设计的"预先去杂-SDS法"从梅花嫩叶提取到高质量的基因组DNA.根据11条已公开发表的并提交到GenBank的类黄酮3'-羟化酶基因cDNA的假定氨基酸序列的保守区设计2个正向简并引物和3个反向简并引物组成6对引物,仅有1对引物能以PCR法同时从梅花'南京红须'、'南京红'和'粉皮宫粉'的基因组DNA扩增到一个469 bp的核苷酸片段,这3个片段在总体上有99.72%的一致性,与11条类黄酮3'-羟化酶基因cDNA的相应区域有65.57%的一致性.同时,"GGEK"并非类黄酮3'-羟化酶的特征性模体.这是首次从木本植物的基因组DNA克隆到类黄酮3'-羟化酶基因片段.本研究结果可为梅花类黄酮3'-羟化酶基因全长的克隆奠定基础.
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关键词
梅花基因组DNA提取类黄酮3'-羟化酶基因片段简并PCRP.mume Sieb.et Zucc.extraction of gDNAsegment of flavonoid 3'hydroxylase genedegenerate PCR
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DOI
10.3969/j.issn.1000-3142.2006.06.007
发布时间
2006-12-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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