换一批MiD49在肝癌中的表达与促增殖作用研究
Experimental study on the expression and pro-proliferative function of MiD49 in hepatocellular carcinoma.
摘要目的 探讨线粒体动力蛋白MiD49在肝癌中的表达及其促增殖作用.方法 ①用实时定量PCR(qRT-PCR)、Western blot及免疫组化实验方法,分别检测MiD49在肝癌细胞株以及50例肝癌手术患者癌与癌旁组织中的表达;②siRNA下调MiD49表达后,分别用MTT与克隆形成实验检测MiD49在肝癌细胞增殖中的调控作用;③siRNA下调MiD49表达后,用流式细胞术检测MiD49在肝癌细胞凋亡中的调控作用.结果 ①肝癌组织中MiD49表达的mRNA与蛋白水平均显著高于癌旁组织[mRNA水平:癌vs癌旁=(0.38±0.28)vs(0.26±0.20);蛋白水平:癌vs癌旁=(5.67±0.47)vs(3.20±0.33)],差异均有统计学意义(P<0.05);肝癌细胞株中MiD49表达高于正常肝细胞[5种肝癌细胞vs正常肝细胞=(2.42±0.23)、(4.57±0.35)、(2.53±0.22)、(3.30±0.44)、(3.11±0.32)vs(1.00±0.08)],差异有统计学意义(P<0.05).②利用siRNA下调MiD49表达可显著抑制肝癌细胞增殖[siRNA vs si-MiD49#1 vs si-MiD49#2=(4.78±0.37)vs(3.07±0.28)vs(3.26±0.21)],差异有统计学意义(P<0.05);利用siRNA下调MiD49表达可显著抑制肝癌细胞克隆形成[siRNA vs si-MiD49#1 vs si-MiD49#2=(449.00±34.00)vs(239.00±20.52)vs(223.66±21.73)],差异有统计学意义(P<0.05).③利用siRNA下调MiD49表达可促进肝癌细胞凋亡[siRNA vs si-MiD49#1 vs si-MiD49#2=(3.90±0.40)vs(12.67±0.96)vs(13.17±1.01)],差异有统计学意义(P<0.05).结论 线粒体动力蛋白MiD49在肝癌中表达显著上调,MiD49高表达可促进肝癌细胞增殖而抑制凋亡,提示MID49是潜在的促癌因子并可作为潜在的肿瘤治疗靶标.
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