重组苏云金芽孢杆菌丙酮酸脱氢酶克隆及表达条件的优化
The Cloning and Expression Optimization of Recombined Bacillus Thuringiensis Pyruvate Dehydrogenase
摘要根据Bc14579丙酮酸脱氢酶基因序列设计引物,从苏云金芽孢杆菌BMB171菌株总DNA中扩增得到相应的丙酮酸脱氢酶基因DNA片段.将DNA片段装载到大肠杆菌构建pET-E1表达系统,再通过优化重组菌的表达条件获得有生物活性的丙酮酸脱氢酶.结果表明, pET-E1表达系统构建获得成功;优化的表达条件如下:培养基为TB+M9(体积比1∶1)、起始菌体密度OD600为4~5.5、诱导剂IPTG浓度为0.04 mmol·L-1.
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