摘要目的 观察健脾化瘀方含药血清上调miR-146a抑制磷脂酰肌醇 3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)通路对结肠癌细胞凋亡的影响.方法 设不同浓度的(5%、10%、20%)健脾化瘀方含药血清处理结肠癌HCT-116 细胞,观察健脾化瘀方含药血清对结肠癌细胞增殖的影响.将miR-NC、miR-146a分别转染至HCT-116 细胞中,记为miR-NC组、miR-146a组;将anti-miR-NC、anti-miR-146a分别转染至HCT-116 细胞中,再予 10%健脾化瘀方含药血清干预,分别记为anti-miR-NC组、anti-miR-146a组、anti-miR-146a+健脾化瘀方含药血清组.通过四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)实验检测细胞增殖情况;Hoechst33258 染色观察细胞凋亡情况;流式细胞术检测细胞凋亡率;逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测miR-146a表达水平;蛋白免疫印迹法(WB)检测PI3K/Akt通路蛋白表达水平.结果 健脾化瘀方含药血清能够显著抑制结肠癌HCT-116 细胞的增殖,并呈浓度依赖性.Hochest33258 染色及流式细胞术均显示健脾化瘀方含药血清能够诱导HCT-116 细胞凋亡,且随着浓度的增加,凋亡率升高.RT-PCR检测结果显示,健脾化瘀方含药血清能上调HCT-116 细胞miR-146a表达.过表达miR-146a后,HCT-116 细胞增殖抑制率及细胞凋亡率均高于miR-NC组(P<0.05);沉默miR-146a后,anti-miR-NC组细胞增殖抑制率及凋亡率与anti-miR-NC组比较差异无统计学意义(P>0.05),而加入健脾化瘀方含药血清后,细胞增殖抑制率及凋亡率较anti-miR-146a组升高(P<0.05).WB结果显示,5%、10%、20%健脾化瘀方含药血清组HCT-116 细胞PI3K、Akt蛋白表达均增加,p-PI3K、p-Akt表达均降低.过表达miR-146a后,HCT-116 细胞p-PI3K、p-Akt蛋白表达均降低;沉默miR-146a后,与anti-miR-NC组比较,p-PI3K、p-Akt蛋白表达稍有升高,加入健脾化瘀方含药血清后p-PI3K、p-Akt蛋白表达降低.结论 健脾化瘀方含药血清能够抑制结肠癌细胞HCT-116 的增殖,并诱导其凋亡,其机制可能是通过上调miR-146a抑制PI3K/Akt通路实现的.