8-Br-cAMP和槲皮素诱导Eca-109细胞p16基因启动子DNA结合蛋白的定位研究
Localization of DNA-binding proteins bound to p16 gene promoter induced by 8-Br-cAMP and quercetin
摘要目的:探讨8-Br-cAMP和槲皮素(quercetin)诱导的Eca-109细胞p16基因启动子特异性结合的序列特异性DNA结合蛋白(DBP)的定位.方法:应用DBP定位改进方法,以制备的特异性DNA探针检测目的DBP在细胞内的定位;以免疫细胞化学技术,检测细胞PCNA免疫反应性,作为肿瘤细胞恶性程度生物标志.结果:DBP定位信号以胞核为主,胞质有阳性信号的细胞,胞膜也呈阳性信号;2实验组信号比对照组强;各组信号均以大细胞更强;PCNA免疫细胞化学阳性呈棕黄色颗粒,主要位于胞核,对照组强于实验组.各组均以大细胞阳性信号更强.结论:2实验组与p16基因启动子结合的DBP主要位于胞核,但核外存在结合潜力的蛋白质.2实验组PCNA免疫反应性均下降.提示这些与p16基因启动子区结合的DBP在一定程度上可诱导细胞恶性逆转化.
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