换一批摘要目的 构建TK6细胞的沉默信息调节因子1(SIRT1)基因沉默细胞株(TK6-shSIRT1),初步探讨SIRT1在氢醌诱导TK6细胞凋亡中的作用.方法 应用慢病毒介导的RNA干扰技术构建TK6细胞的SIRT1沉默细胞株,并用qPCR和Western blotting联合鉴定干扰效果,比较两种细胞的一般生物学特性(细胞形态、细胞增殖能力和细胞周期分布).用不同浓度HQ (2.5 ～40 μmol/L)处理TK6和TK6-shSIRT1细胞48 h后,以CCK-8法检测细胞存活率;以流式细胞术检测细胞周期及凋亡的改变.结果 成功筛选出稳定表达的人淋巴母细胞SIRT1缺陷细胞株,与TK6正常细胞株相比,TK6-shSIRT1细胞中SIRT1在mRNA和蛋白表达水平分别下降了84.6％和94.5％,且生长速度加快了6.57 h,增殖指数增加了11.8％,差异均有统计学意义(P＜0.05),但细胞形态未出现明显改变.经HQ短时间处理后:两种细胞存活率均呈剂量依赖性降低;相同染毒剂量条件下,TK6-shSIRT1细胞的存活率均明显低于TK6细胞(P＜0.05),细胞早期凋亡率高于TK6细胞(P＜0.05).结论 SIRT1缺陷可增加TK6细胞对HQ的敏感性.
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分类号
R994.6（毒物学《毒理学》）
栏目名称
DOI
10.16241/j.cnki.1001-5914.2017.12.008
发布时间
2018-05-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
广东省普通高校重点平台特色创新类项目（2015KTSCX052）
国家自然科学基金（81273116）
广东省自然科学基金（S2013010015153）
东莞市科技计划重点项目（2012108101011）
东莞市社会科技发展（一般）项目（2017507152413）
湛江市非资助科技攻关计划（2017B01061）
广东医科大学面上培育项目（M2016012）
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