BRSV和BPIV-3双重PCR检测方法的建立及初步应用
Establishment and Application of Duplex PCR Assay for BRSV and BPIV-3 Infection
摘要为建立一种快速诊断牛呼吸道合胞体病毒(BRSV),牛副流感病毒3型(BPIV-3)病毒病的方法,根据Genbank中登录的BRSV核衣壳蛋白N基因序列和BPIV-3的核衣壳蛋白N基因序列,利用分子生物学软件Primer5.0设计2对特异引物,经过条件优化,建立了BRSV和BPIV-3的双重PCR检测方法.采用该方法检测BRSV和BPIV-3参考毒株,特异性良好.对参考毒株进行梯度稀释检测,结果该方法检测BRSV的敏感性可达10 TCID50· 100 μL-1,BPIV-3可达10 TCID50·100 μL-1.应用建立的双重PCR方法能够从临床样品中检测出BRSV和BPIV-3.表明建立的双重PCR方法具有特异、敏感、快速的特点,可用于BRSV和BHV-3的临床检测.
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