真核表达载体pEGFP-C3-MASH-1的构建
Construction of Enhanced Green Fluorescent Protein Eukaryotic Expression Vector Carrying MASH1 Gene
摘要目的构建含小鼠MASH1基因的绿色荧光蛋白表达载体pEGFP-C3-MASH1,为进一步研究MASH1在间充质干细胞神经分化中的作用打下基础.方法应用RT-PCR方法从小鼠13.5d胚胎组织中扩增出两端带有HindⅢ和EcoRⅠ酶切位点的MASH1cDNA编码片段,经回收、纯化、酶切后,依次连接到质粒pGEM-T和pEGFP-C3上.结果酶切及测序结果表明:重组质粒PEGFP-C3含有MASH-Ⅰ片段,方向及大小正确.结论成功构建了小鼠真核表达载体PEGFP-C3-MASH-Ⅰ.
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