摘要目的 探讨天麻健脑方治疗缺血性脑卒中(IS)的机制以及对天麻健脑方的活性成分进行筛选.方法 通过TCMSP数据库获取天麻健脑方的活性成分和靶点,在GeneCards、DisGeNET、OMIM获取IS相关靶点,Venny在线平台获取天麻健脑方和IS的交集靶点并通过STRING数据库和Cytoscape 3.7获得PPI网络图,利用DAVID数据库对筛选靶点进行GO分析和KEGG通路富集分析,用Cytohub插件计算前10位靶基因.通过ELISA、RT-qPCR、Western blot验证天麻健脑方对海马神经元细胞HT22中G蛋白偶联雌激素受体(GPER)/表皮生长因子受体(EGFR)/环磷酸腺苷(cAMP)/蛋白激酶A(PKA)信号通路的调控作用.结果 天麻健脑方核心成分包括黄芩素、槲皮素、四氢鸭脚木碱等,主要作用于基质金属蛋白酶9(MMP-9)、肿瘤蛋白53(TP53)、蛋白激酶B1(Akt1)等关键靶点,参与对外源性刺激的反应、对缺氧的反应、脂多糖反应等生物学过程,调控缺氧诱导因子-1A(HIF-1A)、磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)、甲状腺、雌激素等信号通路.细胞实验证实,天麻健脑方可促进氧糖剥夺/复氧(OGD/R)损伤的HT22细胞增殖(P＜0.05或P＜0.01),降低缺血性脑卒中标志因子MMP-9和C反应蛋白(CRP)的表达水平(P＜0.05或P＜0.01),上调GPER/EGFR/cAMP/PKA信号通路相关蛋白的表达(P＜0.05或P＜0.01).雌激素受体抑制剂G15和ICI182780作用后,天麻健脑方对HT22细胞的作用受到不同程度的抑制.结论 天麻健脑方治疗缺血性脑卒中可能是通过激活GPER受体介导雌激素非基因组效应实现的.