薯蓣皂苷元对LPS诱导的人胚肺成纤维细胞的干预机制研究
Research on intervention mechanism of diosgenin on MRC-5 fibrosis induced by LPS
摘要目的 基于MAPK信号通路研究薯蓣皂苷元对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的人胚肺成纤维细胞(MRC-5)的影响,探讨薯蓣皂苷元干预肺间质纤维化的机制.方法 通过LPS诱导MRC-5细胞建立肺纤维化模型,利用CCK-8法检测细胞增殖水平,免疫荧光法检测α-平滑肌动蛋白(alpha smooth muscle actin,α-SMA)表达水平,ELISA法检测TGF-β1、IL-6蛋白表达水平,Western blot测定p-38、p-p38、jnk、p-jnk表达水平.结果 以LPS诱导MRC-5细胞能够成功建立肺纤维化细胞模型,40μmol/L薯蓣皂苷元组细胞增殖水平较模型组明显降低(P<0.01),薯蓣皂苷元组α-SMA表达水平较模型组均有明显下降(P<0.01).与模型组比,10μmol/L薯蓣皂苷元组、40μmol/L薯蓣皂苷元组TGF-β1表达水平明显下降(P<0.01),20μmol/L薯蓣皂苷元组TGF-β1表达水平未见明显下降(P>0.05);与模型组比,10μmol/L薯蓣皂苷元组IL-6表达水平未见明显下降(P>0.05),而20μmol/L及40μmol/L薯蓣皂苷元组IL-6表达明显高于模型组(P<0.01);各组p-38、jnk表达水平无明显差异(P>0.05),p-p38、p-jnk表达水平薯蓣皂苷元组较模型组明显下降(P<0.01).结论 薯蓣皂苷元通过下调LPS诱导的MRC-5细胞中的TGF-β1的表达,可以抑制Smad通路及非Smad通路中诱导肺纤维化的信号通路,阻碍上皮细胞间质化(EMT)进程.并且通过下调TGF-β1表达,薯蓣皂苷元可以有效地抑制MAPK通路中的p38MAPK通路及jnk通路的磷酸化激活,降低α-SMA表达,减少炎性反应、细胞凋亡的发生,从而达到抗肺纤维化的目的.
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