培土清心方降低人肥大细胞HMC1.1突变株与HMC1.2突变株细胞增殖活性及对HMC1.1突变株相关信号通路的影响研究
Chinese herbal formula attenuates the proliferation of human mast cell HMC1. 1 and HMC1. 2 mutant cells and the related signal pathway of HMC1. 1 mutant cells
摘要目的 观察培土清心方对人肥大细胞HMC1.1突变株与HMC1.2突变株细胞增殖活性及对HMC1.1突变株相关信号通路的影响,为中医药复方治疗特应性皮炎提供实验依据.方法 (1)培土清心方实验组不同剂量(0.01 mg/mL、0.05 mg/mL、0.1 mg/mL、0.25 mg/mL、0.5 mg/mL、1.0 mg/mL)分别作用于HMC1.1及HMC1.2细胞,采用Cell Counting Kit-8检测培土清心方对HMC1.1及HMC1.2细胞增殖活性的影响.(2)采用Western blot方法检测培土清心方实验组不同剂量(0.25 mg/mL、0.5 mg/mL、1.0 mg/mL)对HMC1.1细胞C-kit/Stat信号通路的作用.结果(1)培土清心方0.25 mg/mL、0.5 mg/mL、1.0 mg/mL分别作用48小时均能显著抑制HMC1.1与HMC1.2细胞增殖活性(P<0.05),并且呈现一定的剂量依赖性.培土清心方0.25 mg/mL、0.5 mg/mL、1.0 mg/mL分别作用HMC1.1与HMC1.2细胞72小时也呈现剂量依赖性抑制细胞增殖活性作用.尤其是对HMC1.1细胞增殖抑制更为明显.(2)培土清心方对HMC1.1细胞作用8小时后,使Phospho-C-kit(Y703)蛋白表达具有下调趋势,以及一定量降低Phospho-C-kit(Y719)蛋白表达的作用.培土清心方对HMC1.1细胞作用8小时后,使Phospho-Stat1(Y701)/Stat1蛋白表达具有下调趋势,并且呈现出剂量依赖性.结论 实验结果表明培土清心方对人肥大细胞HMC1.1增殖抑制的作用机制可能涉及C-kit/Stat信号通路,对肥大细胞的作用可能是培土清心方治疗特应性皮炎的潜在作用机制之一.
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