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应用噬菌体表面展示技术筛选丙型肝炎病毒NS5A抗原模拟表位

Epitope mapping of hepatitis C virus NS5A antigen from a peptide phage library by using immobilized specific monoclonal antibody

摘要:

目的:筛选丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白NS5A(HCVNS5-A)特异性噬菌体模拟表位,为抗HCV的疫苗研究探索新途径.方法:应用噬菌体表面展示技术,以抗-HCV NS5A的单克隆抗体作为固相筛选分子,对人工合成的噬菌体随机12肽库进行5轮"吸附-洗脱-扩增"的筛选过程,随机挑取30个克隆,经噬菌体酶联免疫吸附法(ELISA)鉴定并进行交叉反应实验以及竞争抑制性结合实验,最后对所选克隆进行DNA序列分析,以确定HCV NS5A抗原的模拟表位.结果:经噬菌体富集后,从随机筛选的30个克隆中得到12个阳性克隆,确定氨基酸序列XXXPXXXLLRXX为HCV NS5A的模拟表位.结论:用噬菌体12肽库成功筛选得到HCV NS5A的模拟表位,为开展用HCV模拟表位探索HCV的防治研究创造了条件.

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作者: 钟彦伟 [1] 成军 [1] 陈新华 [1] 王刚 [1] 洪源 [1] 王琳 [1] 李莉 [1] 张玲霞 [1] 陈菊梅 [1]
分类号: R511
栏目名称: 病毒性肝炎
DOI: 10.3969/j.issn.1009-3079.2002.02.003
发布时间: 2006-07-31
基金项目:
国家自然科学基金
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