酵母双杂交技术筛选Hcbp6结合的肝细胞蛋白编码基因-论文-万方医学网

酵母双杂交技术筛选Hcbp6结合的肝细胞蛋白编码基因

Screening of gene encoding of hepatic proteins interacting with Hcbp6 via yeast two hybridization

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摘要：

目的:Hcbp6是与核心蛋白相结合的未知功能蛋白基因,为了初步提示他的生物学功能和在细胞中的存在形式,采用酵母双杂交体系寻找与他相互作用的肝细胞蛋白,探讨Hcbp6的生物功能.方法:应用酵母双杂交系统3,构建Hcbp6诱饵质粒并转化酵母AH109,与含人肝细胞cDNA文库质粒的酵母Y187进行配合,在涂有x-α-gal营养缺陷型培养基(SD/-Trp-Leu-His-Ade)上筛选生长.挑选蓝色克隆,提取此酵母克隆的质粒,转化大肠杆菌提取质粒DNA后进行测序,然后进行生物信息学分析.结果:筛选出4种与Hcbp6特异性相互作用的蛋白,包括Paralemmin(PALM)、Ran结合蛋白2(Ranbp2)、跨膜运输蛋白21(Tmp21)和血清白蛋白.结论:推测该蛋白可能为一分泌性蛋白,或与分泌蛋白的形成有关,进一步的生物学功能的研究需要更多的实验加以探讨.

作者：王琳 ^[1] 李克 ^[1] 成军 ^[1] 陆荫英 ^[1] 张健 ^[1] 陈天艳 ^[1] 洪源 ^[1] 刘妍 ^[1] 王刚 ^[1] 钟彦伟 ^[1]

作者单位：中国人民解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心,全军病毒性肝炎防治研究重点实验室,北京市,100039 ^[1]

期刊：《世界华人消化杂志》2003年11卷4期 385-388页 ISTIC

主题词：蛋白(Egg White)肝细胞(Hepatocytes)基因(Genes)质粒(Plasmids)生物学(Biology)

分类号： R511

栏目名称： 病毒性肝炎

DOI： 10.3969/j.issn.1009-3079.2003.04.003

发布时间： 2006-07-31

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