VEGF-C基因靶向RNA干扰重组表达载体的构建和表达-论文-万方医学网

VEGF-C基因靶向RNA干扰重组表达载体的构建和表达

Construction and expression of small interfering RNA vector targeting on vascular endothelial growth factor-C

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摘要：

目的:利用质粒pSilencer3.1-H1构建针对人血管内皮生长因子-C(VEGF-C)基因的表达载体,测序鉴定并观察在胃癌细胞中的表达.方法:根据质粒pSilencer3.1-H1要求设计两对小干扰RNA靶序列,退火形成互补的双链,通过与线性化的pSilencer3.0-H1相应位点连接、转化大肠杆菌,扩增、纯化得到所需质粒,酶切电泳及测序鉴定后转染胃癌细胞株SGC-7901,Western blot检测转染前后VEGF-C基因的蛋白表达.结果:经酶切和测序鉴定,针对VEGF-C基因的siRNA表达载体构建成功.转染胃癌细胞株SGC-7901后,Western blot检测显示VEGF-C基因蛋白表达明显降低,pSilencer3.1-VEGF-C1组抑制效果明显,其抑制率为81.2%,与阴性对照组相比差异具有显著性(P＜0.05).结论:成功构建了针对人VEGF-C基因的siRNA表达载体和稳定转染的胃癌细胞株SGC-7901.

作者：周慧聪 ^[1] 亢春彦 ^[2] 张艳 ^[3] 李继昌 ^[1]

作者单位：郑州大学第一附属医院消化内科,河南省郑州市,450052 ^[1] 河南省职工医学院病理教研室,河南省郑州市,450052 ^[2] 郑州大学基础医学院药理教研室,河南省郑州市,450052 ^[3]

期刊：《世界华人消化杂志》2007年15卷13期 1549-1553页 ISTIC

关键词：胃癌血管内皮生长因子-C 重组质粒 RNA干扰

主题词：基因(Genes)胃肿瘤(Stomach Neoplasms)质粒(Plasmids)血管内皮生长因子A(Vascular Endothelial Growth Factor A)细胞(Cells)

分类号： R3

栏目名称： 研究快报

DOI： 10.3969/j.issn.1009-3079.2007.13.018

发布时间： 2007-07-30

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被引：5
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