换一批
换一批大鼠Smad7真核表达质粒的构建及在肝星状细胞中的表达
Construction of eukaryotic expression vector for rat Smad7 and its expression in hepatic stellate cell line HSC-T6
摘要：
目的:构建并鉴定大鼠Smad7真核表达质粒,观察外源Smad7对肝星状细胞HSC-T6的转染.并进一步研究其对TGF-β1及Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA达水平的影响.方法:采用基因重组技术将Smad7 cDNA插入真核表达载体pcDNA3.1(+),构建大鼠Smad7真核表达质粒.脂质体介导转染HSC-T6细胞,分为正常对照组、空质粒组及转染组,G418筛选,挑取阳性细胞,运用Western blot检测Smad7蛋白表达情况,RT-PCR检测Smad7、TGF-β1及Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA的表达水平.结果:酶切和测序结果证实Smad7真核表达质粒构建成功.Smad7转染组与正常对照、空质粒组比较,Smad7 mRNA表达显著增加(1.053±0.009 VS 0.984±0.054,0.986±0.044,P<0.01或0.05),蛋白水平显著上调(0.083±0.02 VS0.058±0.050,0.056±0.064,均p<0.05:Smad7转染组TGF-β1、Ⅰ型胶原mRNA表达降低(0.961±0.013 VS 1.039±0.013,1.032±0.037;0.592±0.096 VS 0.767±0.085.0.770±0.090,均P<0.01);Ⅲ型胶原mRNA表达差异无统计学意义.正常对照、空质粒组Smad7 mRNA和蛋白水平、TGF-β1、Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNAA达差异无统计学意义.结论:smad7可能参与TGF-β/smad信号转导,在一定程度上具有抗纤维化的生物学活性.
更多
作者：
作者单位：
新疆石河子大学医学院第一附属医院老干一科,新疆维吾尔自治区石河子市,832008
[1]
新疆石河子大学医学院第一附属医院心内二科,新疆维吾尔自治区石河子市,832008
[2]
新疆石河子大学医学院第一附属医院消化内科,新疆维吾尔自治区石河子市,832008
[3]
新疆石河子大学医学院第一附属医院中心实验室,新疆维吾尔自治区石河子市,832008
[4]
期刊：
《世界华人消化杂志》2008年16卷28期 3146-3151页
ISTIC
分类号：
R3
栏目名称：
基础研究
DOI：
10.3969/j.issn.1009-3079.2008.28.003
发布时间：
2008-11-20
基金项目：
教育部科学技术研究重点项目
兵团博士基金
- 浏览：170
- 被引：4
- 下载：24
相似文献
- 中文期刊
- 外文期刊
- 学位论文
- 会议论文
