换一批甘露聚糖结合凝集素阻遏人巨细胞病毒感染MD-DC细胞的研究
Mannose-binding Lectin (MBL) Inhibits Human Cytomegalovirus Infection of Human MD-DC
摘要目的 探讨不同来源、不同浓度的甘露聚糖结合凝集素( MBL)阻遏人巨细胞病毒(HCMV)感染人外周血单个核细胞衍生出的DC细胞(MD-DC)的作用.方法 通过载体构建得到重组MBL(rMBL),通过血浆分离得到天然MBL(hMBL),先以不同浓度的hMBL/rMBL预处理MD-DC 0.5h,再以HCMV感染MD-DC 2 h,比较不同浓度的hMBL/rMBL阻遏MD-DC捕获HCMV的作用差异.经HCMV感染后的MD-DC和MBL共培养,比较不同浓度的hMBL/rMBL阻遏HCMV在MD-DC间扩散的作用差异.荧光定量PCR法检测MD-DC内HCMV-DNA的拷贝数,流式细胞仪检测MD-DC内HCMV-PP65的阳性率,激光共聚焦技术观察MD-DC对HCMV的捕获.结果 荧光定量PCR结果显示,与对照组相比,1μg/mL hMBL/rMBL组MD-DC内HCMV-DNA含量均无明显变化(P＞0.05),而5μg/mL和10 μg/mL hMBL/rMBL组MD-DC内HCMV-DNA含量均降低(P＜0.05).激光共聚焦技术和流式细胞术证实10μg/mL hMBL/rMBL能明显阻遏MD-DC捕获HCMV.经HCMV感染后的MD-DC与MBL共培养,在第72 h,5μg/mL和10 μg/mL hMBL/rMBL组开始显现阻遏作用.结论 生理浓度范围(5～10μg/mL)内的hMBL/rMBL能显著阻遏HCMV感染.
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