换一批细粒棘球蚴GST-mu2基因的克隆、表达及重组蛋白反应原性研究
Cloning and Expression of GST-mu2 Gene of Echinococcus granulosus and Reactionogenicity of Recombinant Protein
摘要为了研究细粒棘球蚴(Echinococcus granulosus,Eg)谷胱甘肽S-转移酶mu 2(GST-mu 2)蛋白的反应原性,根据GenBank中Eg GST-mu2基因cDNA序列设计特异性引物,以Eg头节总RNA为模板,进行RT-PCR扩增,将PCR产物克隆到pMD19-T载体,测序验证后,将GST-mu2基因亚克隆至表达载体pET-28a中,构建pET-GST-mu2原核表达载体,将其转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,用IPTG进行诱导表达,并对表达蛋白进行反应原性分析.结果表明,GST-mu2 cDNA全长660个核苷酸,编码219个氨基酸,该多肽合有2个N端酰基化位点,2个PKC磷酸化位点,3个CKⅡ磷酸化位点,1个TYR磷酸化位点,抗原表位区集中在28～70、147～219位;SDS-PAGE可以检测到32 kDa的蛋白特异性条带;Western blot分析显示,表达的pET-GST-mu2重组蛋白能与Eg阳性血清发生特异性反应,具有较强的反应原性,为进一步利用GST-mu2蛋白作为Eg感染诊断的候选抗原奠定了基础.
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分类号
S811.5
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1673-1182.2018.01.004
发布时间
2018-03-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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