换一批腺病毒介导的PML(NLS-)过表达对白血病NB4细胞增殖和凋亡的影响
Effect of adenovirus-mediated PML (NLS-) over-expression on the proliferation and apoptosis of NB4 leukemic cells
摘要目的 利用腺病毒介导PML(NLS-)的过表达,探讨PML(NLS-)对NB4白血病细胞增殖凋亡的影响.方法 重组腺病毒质粒Ad-PML(NLS-)经Pac Ⅰ酶切线性化后转染AD293细胞,获得重组腺病毒Ad-PML(NLS-),经4轮扩增后,测定重组腺病毒滴度;重组腺病毒感染NB4细胞,荧光显微成像和流式细胞术检测感染效率,RT-PCR法和Western blot法检测NB4细胞中PML(NLS-)的转录及表达水平,MTT实验观察细胞增殖,流式细胞术分析细胞周期及凋亡.结果 重组腺病毒质粒Ad-PML(NLS-)经酶切和测序鉴定正确,经4轮扩增病毒滴度为1 ×1010pfu/mL;重组腺病毒Ad-PML(NLS-)感染NB4细胞效率达75％,PML(NLS-)基因可在NB4细胞中高效表达;NB4细胞增殖活力明显高于未感染组和空病毒载体感染组(P＜0.05),S期细胞比例明显增高(P＜0.05),G2期细胞比例明显减少(P＜0.05);实验组细胞凋亡率明显低于空病毒感染组(P＜0.05).结论 PML(NLS-)过表达能够促进白血病NB4细胞的体外增殖能力,抑制其凋亡.
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医学主题词
细胞增殖(Cell Proliferation)细胞(Cells)白血病, 早幼粒细胞, 急性(Leukemia, Promyelocytic, Acute)感染(Infection)白血病(Leukemia)
分类号
R557（血液及淋巴系疾病）
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1001-6325.2014.10.004
发布时间
2014-10-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家自然科学基金（81171658）
重庆市自然科学基金重点项目（2011BA5037）
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